تقنيات التعقيم في مختبرات زراعة الأنسجة النباتية
في مجال زراعة الأنسجة النباتية، يمثل التعقيم حجر الزاوية لنجاح أي تجربة. ففي قلب المختبرات والمعامل المعقمة، تُجرى عمليات دقيقة لتهيئة بيئة مثالية لنمو الأنسجة النباتية. وأي تلوث، سواء كان في الأكواب أو الماصات أو أوعية الاستزراع، كفيل بإفساد التجربة بأكملها. ولحسن الحظ، توجد عدة طرق وأساليب تضمن التعقيم الفعال. سمير البوشي يستعرض في مقال له منشور في بوابة السعودية، مجموعة من هذه الأساليب الأساسية.
الأساليب الرئيسية للتعقيم
التعقيم بالحرارة
يعتمد التعقيم بالحرارة بشكل أساسي على نوعين:
-
التعقيم الحراري الرطب: يعتمد على استخدام البخار الساخن تحت ضغط عال لتعقيم الأدوات المخبرية، الزجاجيات، الماصات، والأوساط المزروعة. يتم ذلك باستخدام جهاز الأوتوكلاف، الذي يقضي على جميع الكائنات الدقيقة تقريبًا.
-
التعقيم الحراري الجاف: يستخدم لتعقيم الأدوات المعدنية المعرضة للصدأ عند استخدام التعقيم الرطب. تُستخدم أدوات مثل معقمات الخرز الزجاجي وموقد بنسن لتعقيم الحاملات والملاقط.
التعقيم بالترشيح
تتأثر بعض مكونات الوسائط، مثل المستخلصات النباتية والهرمونات، بالحرارة العالية أثناء التعقيم، مما يستدعي استخدام التعقيم بالترشيح. يتم ذلك بواسطة حقنة وإبرة وغشاء مرشح. يمكن إضافة هذه المكونات الحساسة للحرارة إلى الوسائط في مُحضِّر الوسائط عبر حقنها من خلال وصلة الحاجز الموجودة على الغطاء. يحدد الغشاء حجم المسام، وبالتالي حجم الكائنات الحية الدقيقة التي ستتم تصفيتها، مما يضمن إزالة جميع الجسيمات والكائنات الدقيقة الأكبر من قطر المسام.
تعقيم الهواء
نظرًا لوجود العديد من الميكروبات في الهواء المحيط التي قد تستقر على الأسطح، يتم تعقيم الهواء باستخدام معدات متخصصة مثل خزانات التدفق الصفائحي. هذه الخزانات تمرر الهواء عبر فلتر يقوم بحجز الفطريات والبكتيريا وجزيئات الغبار الأخرى.
التعقيم المجزأ أو التندلة
استُخدمت هذه الطريقة للقضاء على الأبواغ المقاومة للحرارة، حيث يتم تسخين الوسط في حمام مائي لمدة ساعة واحدة لثلاثة أيام متتالية، ثم يتم الاحتفاظ به في درجة حرارة الغرفة بعد غليه مرتين متتاليتين.
تعقيم الأسطح
تستخدم هذه التقنية لتعقيم سطح النبات المستأصل المستخدم في عمليات زراعة الأنسجة.
تعزيز إجراءات التعقيم
لتعزيز فعالية التعقيم، يمكن اتباع الإجراءات التالية:
-
وضع المادة في محلول كحول إيثيلي 70% قبل التعقيم يزيد من فعاليته.
-
إضافة عامل ترطيب، مثل TWEEN® 20 أو 80، يقلل من التوتر السطحي.
-
إجراء عملية التعقيم تحت التفريغ يساعد في التخلص من فقاعات الهواء، مما يوفر تعقيمًا أكثر كفاءة.
و أخيرا وليس آخرا في نهاية المقال :
من خلال استعراض طرق التعقيم المختلفة في مختبرات زراعة الأنسجة النباتية، ندرك مدى أهمية هذه العمليات لضمان نجاح التجارب والحفاظ على نقاء الأنسجة المزروعة. من التعقيم بالحرارة والترشيح إلى تعقيم الهواء والأسطح، تتكامل هذه الأساليب لتوفير بيئة معقمة مثالية. هل يمكن لهذه الإجراءات أن تتطور مستقبلًا لتقديم حلول أكثر فعالية وسرعة في عالم زراعة الأنسجة؟
